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HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决?
点击:1次,时间:2019-07-02 08:45:54

HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决?

:关于漂移问题: 

1.温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定;

2.流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等;

3.柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡。

关于快速变化问题:

一、、问:在对新购买的HPLC色谱柱进行验收测试时发现柱压过高,请问为什么?

答:柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。

1.拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;

2.把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;

3.将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;

更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一二、个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。

 1.流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定;

2.泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出;

3.流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。

 三、问:HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法?

 : 1.样品量不足,解决办法为增加样品量;

2.样品未从柱子中流出,可根据样品的化学性质改变流动相或柱子;

3.样品与检测器不匹配,根据样品化学性质调整波长或改换检测器;

4.检测器衰减太多,调整衰减即可;

5.检测器时间常数太大,解决办法为降低时间参数;

6.检测器池窗污染,解决办法为清洗池窗。

7.检测池中有气泡。解决办法为排气。

8.记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。

9.流动相流量不合适。调整流速即可。

10.检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。


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